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Colección de semen del semental y manipulación para inseminación artificial

Colección de semen del semental y manipulación para inseminación artificial

El semen de los sementales generalmente se recolecta con una vagina artificial con el semental montado en una yegua en celo o en una montura ficticia. El semen recién recolectado puede ser evaluado y utilizado para la inseminación artificial de yeguas.

Para comenzar un programa de recolección de semen / inseminación artificial, los requisitos mínimos incluyen:

  • Un cobertizo de cría, óptimamente con una yegua fantasma o una montura ficticia.
  • Una vagina artificial y suministros relacionados.
  • Equipo de laboratorio, como un microscopio para evaluar la movilidad de los espermatozoides, una máquina de conteo de espermatozoides para determinar la concentración de espermatozoides, una incubadora para mantener calientes los suministros y utensilios diversos, como portaobjetos de microscopio, pipetas y vasos de plástico desechables.

    La mayoría de los sementales se pueden entrenar fácilmente para la recolección de semen con una vagina artificial, siempre que tanto el técnico como el técnico de recolección de semen tengan experiencia. La libido o el impulso sexual del semental y la experiencia reproductiva del semental también son factores importantes a tener en cuenta al entrenar a un semental para la recolección de semen.

    Los programas de inseminación artificial con semen fresco brindan excelentes resultados siempre que la calidad del semen sea aceptable y el semen se maneje adecuadamente después de la recolección. También es muy importante criar a la yegua en el momento adecuado durante su ciclo; por lo tanto, las yeguas deben ser provocadas hasta que estén en celo y luego evaluadas de manera óptima por palpación y / o ultrasonido para determinar un buen momento de reproducción en relación con la ovulación.

    La principal ventaja de realizar una inseminación artificial con semen fresco es que una eyaculación se puede dividir entre varias yeguas que están listas para ser criadas, lo que aumenta el libro de yeguas para un semental en particular en una temporada determinada. La realización de inseminación artificial también evita los riesgos inherentes de manipular sementales y yeguas para la cobertura natural, o las yeguas reproductoras que no resisten bien la reproducción durante el calor.

    La principal desventaja de realizar una inseminación artificial es el requisito de equipo especializado y capacitación. Si el semen no se maneja adecuadamente y el momento de la inseminación no es exacto, las tasas de embarazo pueden ser subóptimas en los programas de inseminación artificial.

  • El semen de los sementales se recolecta más comúnmente con la ayuda de una vagina artificial mientras se monta una yegua en celo, una yegua ovariectomizada o una montura ficticia. Existen varios tipos de vaginas artificiales, y las más utilizadas en los Estados Unidos son Missouri, la Universidad Estatal de Colorado y las japonesas o Nishikawa. Existen otros métodos de recolección de semen, incluida la recolección de semen con el semental parado en el suelo o la estimulación manual en lugar de una vagina artificial. Estos son buenos métodos alternativos en algunos casos, particularmente con sementales con necesidades especiales, pero no se han utilizado ampliamente para la recolección de semen de rutina y requieren capacitación especial.
  • La elección de la vagina artificial que se utilizará depende de la preferencia y la experiencia del técnico de recolección de semen. Por ejemplo, el modelo Missouri es fácil de manejar y lavar y la mayoría de los sementales responden bien con este tipo de vagina. Además, la longitud de esta vagina se ajusta a la longitud del pene de la mayoría de los sementales, evitando el choque térmico de los espermatozoides que se producirá si el semen está expuesto a la camisa de agua interior de la vagina. El diseño también elimina la posibilidad de contaminación del agua de la muestra de semen.

    Preparando la Vagina Artificial

  • Antes de la recolección de semen, el interior de la vagina debe estar limpio y seco.
  • Una bolsa estéril de hidromasaje u otro tipo de receptáculo (es decir, biberón o forro para biberones) se asegura al extremo distal de la vagina artificial para recoger el semen durante la eyaculación.
  • El interior de la vagina artificial está lubricado con un lubricante estéril soluble en agua no espermicida (es decir, KY Jelly no es aceptable porque contiene una sustancia bactericida que puede afectar la viabilidad de los espermatozoides). El lubricante se extiende insertando el brazo del operador en la vagina protegida por una manga de palpación limpia hasta los hombros. La vagina solo debe lubricarse hasta aproximadamente dos tercios de su longitud para evitar la contaminación excesiva de la muestra de semen con lubricante.
  • La chaqueta de agua de la vagina se llena con agua caliente del grifo a unos 50 a 55 grados centígrados. Se puede usar un termómetro no rompible para medir la temperatura dentro de la abertura de la vagina, ¡pero asegúrese de quitar el termómetro antes de la recolección de semen! Una temperatura final de 42 a 48 C es apropiada para la mayoría de los sementales. Muchos sementales no parecen recibir suficiente estimulación para eyacular a temperaturas más bajas. Las temperaturas superiores a 50 C pueden quemar el pene del semental, lo que resulta en una experiencia negativa a largo plazo.
  • Una vez que la vagina artificial está a la temperatura correcta, la cubierta exterior de cuero se asegura y la presión del interior de la vagina se ajusta liberando agua de acuerdo con el tamaño del pene y las preferencias de presión del semental que se recogerá. Algunos sementales requieren más presión que otros para una estimulación adecuada y solo trabajando con un semental de manera regular se pueden conocer sus preferencias individuales. Como regla general, uno debe poder acomodar su brazo cómodamente dentro de la luz de la vagina y cerrar el puño con la mano.

    Limpieza y cuidado de la vagina artificial

  • La vagina artificial debe limpiarse a fondo después de la recolección de semen para evitar la contaminación cruzada entre los sementales y la contaminación de la muestra de semen. Los pasos exactos de limpieza varían entre granjas y laboratorios.
  • La mayoría de las personas primero limpian el revestimiento de goma solo con agua del grifo. Luego, el revestimiento de goma se sumerge en un baño de alcohol (alcohol isopropílico al 70 por ciento) durante aproximadamente 20 minutos para la desinfección y luego se cuelga en un gabinete limpio para su secado. La mayoría de los detergentes dejarán residuos espermicidas incluso después de un enjuague completo, por lo que deben evitarse por completo. Los productos de caucho son particularmente vulnerables a albergar residuos de espermicidas. Los agentes espermicidas pueden tener diversos grados de daño a los espermatozoides. Algunos matan esperma de inmediato, otros lentamente. Por lo tanto, es posible que no detecte daños incluso bajo un microscopio antes de que se insemine el semen, pero los espermatozoides dañados pueden no producir las tasas de embarazo esperadas.

    Todos los utensilios que entren en contacto con el semen deben mantenerse en una incubadora a 98.6 grados Fahrenheit (37 C). Los portaobjetos y cubreobjetos pueden mantenerse encima de una etapa de calentamiento también establecida a 98.6 F (37 C). Un cambio repentino en la temperatura dará como resultado una disminución de la viabilidad de los espermatozoides y puede poner en peligro el programa de reproducción. Sin embargo, los espermatozoides también mueren a temperaturas superiores a 98.6 F, y la mayoría de las incubadoras están muy por encima de eso. Por esta razón, el semen no debe colocarse en una incubadora o en la parte superior de una etapa de calentamiento de portaobjetos después de la recolección, y la temperatura de la incubadora siempre debe verificarse al retirar un elemento de suministro que entrará en contacto con el semen. Es mejor tener los suministros que entran en contacto con los espermatozoides demasiado fríos que demasiado calientes.

    Del mismo modo, todos los utensilios deben estar limpios y secos antes del contacto con la muestra de esperma. El agua y los residuos de detergentes o desinfectantes son espermicidas. Por esta razón, se recomienda el uso de utensilios desechables. Todos deben ser evaluados para asegurarse de que no sean tóxicos para los espermatozoides.

    Procese las muestras de semen en un laboratorio a una temperatura ambiente constante de aproximadamente 72 a 75 F (23 a 25 C). La muestra de semen debe manejarse con cuidado. Evite verter en el fondo de un cilindro graduado; en su lugar, vierta cuidadosamente por el costado del cilindro. Además, evite la exposición a corrientes de aire frío o luz solar directa. La clave del éxito es ser exhaustivo pero rápido en el procesamiento y la extensión de la muestra de semen, ya sea para empaquetar para el envío o para la inseminación inmediata en la granja.

    Nuevamente, una vez que se procesa la muestra de semen, no la coloque nuevamente en la incubadora o en un baño de agua tibia. En su lugar, deje que se enfríe lentamente a temperatura ambiente hasta que se use para inseminación artificial.

    Los émbolos de goma en jeringas de tipo tradicional a veces están recubiertos con una sustancia que puede ser tóxica para los espermatozoides. Las jeringas de plástico sin espermicida (sin émbolos de goma) deben usarse para manipular el semen y para la inseminación.

    Extensores de semen

    Los extensores de semen se usan para diluir el semen, proporcionando una fuente de energía para las células espermáticas, protegiendo a los espermatozoides contra los cambios de temperatura y / o pH, y para evitar la contaminación bacteriana excesiva de la muestra. En términos generales, los extensores EXTENDEN la vida de la muestra de semen.

    El extensor más comúnmente utilizado tanto para la inseminación artificial como para el semen refrigerado transportado es un extensor a base de leche que fue desarrollado por el Dr. Kenney en la Universidad de Pennsylvania en 1975. Este extensor contiene leche descremada descremada (es decir, Sanalac® o marca de la tienda). ), glucosa y un antibiótico. Los componentes se mezclan en agua estéril.

    Originalmente, los antibióticos añadidos al extensor eran penicilina y gentamicina. Investigaciones más recientes han demostrado que otros antibióticos pueden ser más adecuados, ya que son menos tóxicos para los espermatozoides durante el tiempo de almacenamiento. Actualmente, los antibióticos más comúnmente utilizados para los extensores de semen son ticarcilina, amikacina, una combinación de penicilina y amikacina, o polimixina B.

    Hacer su propio extensor requiere una capacitación adecuada en habilidades de laboratorio, una escala de laboratorio precisa y una fuente confiable de agua desionizada estéril, que se puede comprar aunque es costosa. De lo contrario, los componentes previamente medidos del extensor y el agua previamente medida pueden obtenerse comercialmente de diferentes compañías que venden suministros para la recolección de semen equino y la inseminación artificial.

    Evaluación de semen en la granja

    De manera óptima, el volumen, la concentración de espermatozoides y el porcentaje de espermatozoides móviles progresivamente deben evaluarse para cada eyaculación. Por lo tanto, cada operación de cría debe tener un laboratorio equipado con una incubadora, recipientes desechables de semen (vasos o cilindros graduados), un microscopio y algunos medios para evaluar los espermatozoides.

    Los siguientes son pasos sugeridos para la evaluación de la muestra de semen:

  • Aspecto de la muestra. Esto se refiere principalmente al color. El semen es normalmente de color blanquecino a grisáceo y cremoso a translúcido, dependiendo de la concentración de esperma. Por ejemplo, una muestra amarilla puede indicar contaminación con orina, y una muestra de color rosado o marrón puede indicar contaminación con sangre, las cuales matarán a los espermatozoides. Una muestra transparente puede indicar que solo se eyaculó líquido seminal y no esperma. Se deben tener en cuenta los grumos, pedazos u otros desechos.
  • Volumen. Esto se mide colocando el semen en un cilindro o copa graduado preciso. El volumen solo es importante como medio para calcular el número total de espermatozoides en la muestra y no tiene una relación directa con la calidad de la eyaculación.
  • Concentración. La concentración de espermatozoides en la muestra se puede medir mediante un hemocitómetro o máquinas disponibles en el mercado especialmente diseñadas para contar espermatozoides de sementales. Se concentra en millones de espermatozoides por mililitro de semen. La concentración de esperma no tiene sentido por sí sola en lo que respecta a la calidad del semen, y solo es importante para calcular la cantidad total de esperma.
  • Número total de espermatozoides. El número total de espermatozoides se puede calcular multiplicando el número de espermatozoides por mililitro (o concentración) por el volumen de la muestra. El número total de espermatozoides se expresa tradicionalmente en miles de millones.
  • Porcentaje de espermatozoides móviles. El porcentaje de espermatozoides móviles se evalúa colocando una gota de semen en un portaobjetos de microscopio caliente y un cubreobjetos caliente y observándolo bajo el microscopio. Generalmente se estiman dos tipos de motilidad de los espermatozoides. La motilidad total es el porcentaje de espermatozoides que se mueven, en cualquier forma o dirección. La motilidad progresiva incluye solo el porcentaje de esperma que se mueve en línea recta y es lo más importante.
  • Número total de espermatozoides progresivamente móviles. Una dosis de reproducción con semen fresco extendido debe contener un MÍNIMO de 500 millones de espermatozoides móviles progresivamente. Una vez que se ha calculado el número total de espermatozoides y se ha evaluado el porcentaje de espermatozoides móviles progresivamente, se puede calcular el número total de espermatozoides móviles progresivamente. Esto nos permitirá saber cuántas yeguas pueden criarse con una eyaculación determinada.

    Preparación de semen

    Una vez que el semen ha sido recolectado y evaluado adecuadamente, está listo para la inseminación de yeguas. Aunque no siempre es necesario, agregar un extensor para la inseminación optimizará la supervivencia de los espermatozoides durante el tiempo necesario para preparar a la yegua para la cría y reducirá la contaminación del útero de la yegua en la cría. Esto es especialmente importante en yeguas susceptibles a desarrollar infecciones uterinas después de la cría. Para la inseminación inmediata, agregar un volumen igual de extensor que el del semen (relación de dilución 1: 1) suele ser suficiente y no requiere ningún cálculo especial.

    Mientras haya suficientes espermatozoides móviles progresivamente, la eyaculación extendida simplemente se divide entre el número de yeguas a criar, o la eyaculación completa se usa para criar una sola yegua. La dosis mínima de inseminación necesaria para evitar comprometer las tasas de fertilidad es de 500 millones de espermatozoides móviles progresivamente por yegua. Sin embargo, se debe usar la mayor cantidad de esperma disponible para la inseminación.

    Preparación de yegua

    Una vez que se determina que una yegua (o grupo de yeguas) está lista para la cría, se envuelve la cola de la yegua y el área perineal alrededor de la vulva se lava a fondo y se enjuaga generosamente tres veces. Los exfoliantes con yodo de povidona se pueden usar para este propósito, pero todos los residuos deben enjuagarse completamente con agua para evitar la introducción de este desinfectante en el útero mientras se inserta la pipeta para la inseminación. Después de fregar y enjuagar a fondo, el área perineal se seca con toallas de papel limpias. La yegua está lista para la inseminación.

    Procedimiento de inseminación

    En preparación para la inseminación artificial, el volumen correspondiente de semen extendido se extrae en una o más jeringas (sin émbolo de goma) conectadas a una pipeta de plástico larga desechable.

    El veterinario o gerente que realiza el procedimiento debe usar una manga plástica limpia y un guante estéril en la mano que se usará para introducir la pipeta en el útero. La mano enguantada puede lubricarse con una gelatina estéril soluble en agua para facilitar el procedimiento. Luego, la pipeta se ahueca dentro de esta mano, y se dirige a través de los labios vulvares, el vestíbulo, hacia la vagina, y luego se inserta a través del cuello uterino, mientras que la mano opuesta permanece fuera de la yegua para empujar el émbolo de la jeringa e inyectar el semen a través de la pipeta. . Para una inseminación exitosa, el semen debe depositarse dentro del útero.